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熒光標記二抗種類繁多，如何選擇？

一般來講，偶聯(lián)到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine）和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗，對于Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶標二抗；而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學，組織免疫化學，流式細胞術）中通常使用熒光標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使Biotin/Avidin檢測系統(tǒng)。其中熒光素是具有光致熒光特性的染料，熒光染料種類很多，目前常用于熒光標記二抗的主要有以下幾種： 異硫氰酸熒光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC) FITC純品為黃色或橙黃色結晶粉末，易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389.4，最大吸收光波長為490～495nm，最大發(fā)射光波長為520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年，是目前應用最廣泛的熒光素。由于FITC是小分子化合物，每一個抗體可標記幾個FITC分子，IgM通常用小分子的熒光素標記，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC熒光二抗主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感，通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。然而FITC的缺點是淬滅快，因此要和抗淬滅劑一起使用。 四甲基異硫氰酸羅丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC)，Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR) 這些羅丹明的衍生物耦聯(lián)基團具有不同的吸收波長 (550, 570, 596nm)和最大發(fā)射波長（570, 590, 620nm）。在使用裝有氪氬燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標記的實驗時，RRX尤其有用，可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用，因為RRX的發(fā)射波長在Cy2和Cy5中間，而且和這兩者覆蓋都很少，氪氬燈激發(fā)光為488nm，598nm和647nm，分別是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激發(fā)波長。因為FITC和PE可以被氬燈的488nm波長激發(fā), 在流式細胞儀中用FITC作雙標，另一種用藻紅蛋白（PE）耦聯(lián)基團要比羅丹明好。TRITC為羅丹明的衍生物，呈紫紅色粉末，較穩(wěn)定，最大吸收光波長為 550nm，最大發(fā)射光波長為620nm，呈現(xiàn)橙紅色熒光，與FITC的綠色熒光對比鮮明，可配合用于雙重標記或?qū)Ρ热旧?。因TRITC熒光淬滅慢，也可用于單獨標記染色。 菁類染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5) Cy2耦聯(lián)基團激發(fā)波長為492nm，發(fā)光波長為510nm的綠色可見光。Cy2和FITC使用相同的濾波片。由于Cy2比FITC在光下更穩(wěn)定，要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片劑，因為這種抗淬滅劑和Cy2反應，在染色片儲存后會導致熒光微弱和擴散。Cy3和Cy5比其他的熒光團探針要更亮，更穩(wěn)定，背景更弱。Cy3耦聯(lián)基團激發(fā)光的最大波長為550nm，最強發(fā)射光為570nm。因為激發(fā)光和發(fā)射光波長很接近TRITC, 在熒光顯微鏡中，可使用和TRITC一樣的濾波片。Cy3在氬光燈（514nm或528nm）下可以被激發(fā)出50％的光強，在氦氖燈（543nm）或者汞燈（546nm）下則約75％。Cy3可以和熒光素一起作雙標。Cy3還可以和Cy5一起在共聚焦顯微鏡實驗中作多標記。Cy5耦聯(lián)基團的激發(fā)波長最大650nm，發(fā)光波長最大670nm。在氪氬燈（647nm）下它們可被激發(fā)出98％的熒光，在氦氖燈下（633nm）為63％。Cy5可以和很多其他的熒光基團一起用在多標記的實驗中。由于它的最大發(fā)射波長在670nm，Cy5很難用裸眼觀察，而且不能用汞燈作理想的激發(fā)。通常觀察Cy5時采用具有合適激發(fā)光和遠紅外檢測器的共聚焦顯微鏡，在水相封片劑中應當加入抗淬滅劑。使用傳統(tǒng)的表面熒光顯微鏡時，不推薦使用Cy5。注：由于觀察熒光需要一定波長的激發(fā)光，必須根據(jù)實驗室已有的儀器可發(fā)光的波段進行選擇。另外注意多標記中對探針色彩區(qū)分程度的要求，例如，若丹明紅-X (RRX)和德克薩斯紅(TR)熒光素的區(qū)別就比四甲基若丹明（TRITC）或者Cy3的區(qū)別明顯。如果對靈敏度有更高的要求，則Cy3和Cy5就比其他的熒光團探針要亮。 西美杰代理的全球知名二抗和底物生產(chǎn)廠商LGC·Seracare·KPL提供豐富的熒光標記二抗，可檢測抗人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛，以及多種細菌類等物種；另外，還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同類型抗體。小編下面匯總了部分常用熒光二抗：FITCTRITCCy3Cy5抗人5230-02885230-0288-5230-0370抗小鼠5230-04275230-03365230-03645230-0376抗兔5230-02985230-03325230-03595230-0372抗山羊5230-0294-5230-03585230-0371抗綿羊5230-0324---抗雞5230-0325--5230-0379抗鴨5230-0326---抗狗5230-0314---抗貓5230-0317---鏈霉親和素5270-0028 -5270-0022 -注：表格數(shù)字部分為產(chǎn)品貨號如對西美杰代理的LGC·Seracare·KPL產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄官方網(wǎng)站www.tzapk.com了解更多信息。 更多>

Jena Bioscience熒光標記試劑盒，科研優(yōu)選

標記核苷酸是生命科學研究的一類關鍵試劑，是分子生物學研究中用于檢測和標記特定核酸序列的有效工具，通常通過酶反應將標記核苷酸插入到DNA或RNA序列中進行檢測和分析。而熒光基團和半抗原是最常用的非放射性DNA/cDNA探針標記物。 Nick translation是基因組DNA、質(zhì)粒、BAC克隆等生成標記DNA探針（100-500bp）的首選方法。它是基于DNA酶I(introduction of random single-strand breaks (“nicks”)和聚合酶I的協(xié)同反應，聚合酶I在“nick”位點結合標記的dUTP，而不是其天然對應物dTTP，從而創(chuàng)造出理想的原位雜交探針。 西美杰代理的Jena Bioscience品牌提供了有豐富的DNA/cDNA標記產(chǎn)品，包括熒光標記和半抗原標記，如下表所示:Fluorescent Nick Translation Labeling Kits 品名 貨號 規(guī)格 Atto425 NT Labeling Kit PP-305S-425 10 reactions Fluorescein NT Labeling Kit PP-305S-FAMX 10 reactions AF488 NT Labeling Kit PP-305S-AZ488 10 reactions Atto488 NT Labeling Kit PP-305S-488 10 reactions Cy3 NT Labeling Kit PP-305S-CY3 10 reactions Atto550 NT Labeling Kit PP-305S-550 10 reactions AF555 NT Labeling Kit PP-305S-AF555 10 reactions TexasRed NT Labeling Kit PP-305S-TXR 10 reactions AF594 NT Labeling Kit PP-305S-AF594 10 reactions Atto647N NT Labeling Kit PP-305S-647N 10 reactions AF647 NT Labeling Kit PP-305S-AF647 10 reactions Atto680 NT Labeling Kit PP-305S-680 10 reactions Biotin & Digoxigenin Nick Translation Labeling Kits 品名 貨號 規(guī)格 Biotin16 NT Labeling Kit PP-310S-BIO16 10 reactions Digoxigenin NT Labeling Kit PP-310S-DIGX 10 reactions 北京西美杰科技有限公司為Jena Bioscience中國代理，為客戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站 西美杰代理的Jena Bioscience由德國馬普所(MPI)的知名分子生物學家于1998年共同創(chuàng)辦，致力于為全球的科研院所，醫(yī)院，制藥企業(yè)和診斷試劑盒生產(chǎn)企業(yè)提供各類試劑與原料, 供應特色標記核苷酸/類核苷，標記熒光探針、點擊化學、蛋白結晶等產(chǎn)品，分別通過DIN EN ISO 9001，DIN EN ISO 14001，EMAS認證，質(zhì)量被80多個國家客戶認可。 品牌優(yōu)勢： 以核苷，核苷酸類似物為特色的產(chǎn)品 種類齊全：核苷，核苷酸及類似物，蛋白及蛋白表達系統(tǒng)，點擊化學試劑，生物大分子結構研究相關試劑，分子生物學和生物化學相關試劑 強大的技術團隊可提供高質(zhì)量定制服務 產(chǎn)品質(zhì)量有保障，通過多種認證 產(chǎn)品和服務被80多個國家客戶認可 主要產(chǎn)品分類： 核苷、核苷酸類似物： 標記核苷酸、脫氧/雙脫氧核糖核苷酸、核苷酸類似物 點擊化學：帶有點擊基團的核苷酸、熒光素、生物素、ATP類似物等； 蛋白結構相關產(chǎn)品：蛋白結晶條件篩選試劑盒、蛋白結晶耗材 分子生物學：不同要求PCR試劑盒及單組分產(chǎn)品，DNA LEEDER，限制性內(nèi)切酶、TAE、TBE 更多>

【技術在線】HCP ELISA方法驗證——稀釋線性dilution linearity

稀釋線性（dilution linearity）是驗證HCP ELISA方法特異性和準確性的關鍵實驗之一，本文詳細解讀了HCP ELISA方法學驗證中有關稀釋線性的操作方法與注意事項，歡迎了解。 更多>

Mirus Bio新上市轉染試劑TransIT?-AAViator，基于逆向工程，最大化的提升AAV滴度和實心率！

腺相關病毒 (AAV) 是基因治療中最廣泛使用的傳遞/遞轉機制。近年來，基于AAV病毒所開發(fā)的基因療法研發(fā)及臨床試驗注冊數(shù)量也呈指數(shù)級增長，也需要AAV病毒生產(chǎn)工藝及產(chǎn)能的不斷優(yōu)化及擴展，從最早基于貼壁細胞工藝升級轉換到以懸浮為主的200-2000L反應體系。 Mirus Bio成立于1996年，在核酸遞送領域深耕多年，于2021年8月推出GMP級別TransIT-VirusGEN® GMP 轉染試劑，支持AAV及LV從科研到GMP商業(yè)化生產(chǎn)。不同于傳統(tǒng)基于單組分的轉染試劑(如陽離子聚合物聚乙烯亞胺，PEI)，Mirus Bio將專利的多聚物及脂質(zhì)技術進行多重組合，形成多功能性的轉染方案，克服細胞遞轉過程中的多重阻礙，以實現(xiàn)更高效轉染和更低細胞毒性，從而大幅度提升多種血清型AAV病毒生產(chǎn)載量。去年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer，已證明在不同AAV血清型別中，可提高AAV病毒基因組滴度1.2-4.9倍，并且在一定程度改善了實心率。更重要的是，RevIT? AAV Enhancer不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉染試劑，也適配于其他轉染試(如PEI等)，使得AAV生產(chǎn)上游成本的進一步降低成為可能，進而降低了基因治療單劑量成本。下圖展示了國內(nèi)客戶前期測試反饋結果，測試包括了不同血清型別的質(zhì)粒設計，適用于國內(nèi)及國外品牌的轉染試劑、細胞及培養(yǎng)基體系，實現(xiàn)了1.5-4倍以上的AAV病毒滴度提升。 RevIT Enhancer在國內(nèi)客戶不同AAV項目平臺上的測試反饋結果 隨著國內(nèi)外客戶項目及管線推進，已有越來越多的客戶將TransIT-VirusGEN® 轉染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶階段線性放大至200L-500L反應器，并且已應用到處于臨床申報產(chǎn)品中。ReciBioPharm 與Mirus Bio合作， Chris Brown(工藝流程開發(fā)部門)在線上(鏈接)展示了TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)結果，并且比較了所有測試規(guī)模(搖瓶&反應器)，反饋病毒滴度放大效果非常好，并且實心率也保持相同水平，在 50 升的生物反應器中，也有著40%以上實心率。Chris Brown表示“選擇用TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer產(chǎn)品，是基于我們以往的測試數(shù)據(jù)，允許最大限度地提高 AAV 產(chǎn)量。產(chǎn)量的提高，單個50 升生物反應器可生產(chǎn)更多劑量，從而降低單位劑量的成本?！?更多的，Bridgebio在poster中分享了基于AAV5型別，使用TransIT-VirusGEN® 轉染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶線性放大至200L反應體系(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L)，病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結果(圖1)。與原有工藝相比 (Process A：PEIPro轉染 + Expi293細胞/培養(yǎng)基)，替換成TransIT-VirusGEN® 轉染試劑后的工藝流程 (Process B：TransIT-VirusGEN® 轉染試劑 + Expi293細胞 + BalanCD培養(yǎng)基；Process C：TransIT-VirusGEN® 轉染試劑 + VP2.0細胞 + BalanCD培養(yǎng)基)均有著更高的病毒滴度(圖2)和更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 圖1. 從125mL搖瓶線性放大至200L反應體系的病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結果 圖2. 采用Mirus的工藝平臺均有著更高的病毒滴度 Mirus Bio 并沒有止步于此，并于2024年10月7日重磅推出 TransIT®-AAViator AAV轉染試劑。繼續(xù)沿用Mirus Bio 多聚物及脂質(zhì)兩組分的經(jīng)典組合，不同的是應用逆向工程思維，基于現(xiàn)有RevIT? AAV Enhancer，從Mirus Bio多聚物及脂質(zhì)庫中，分別篩選出更優(yōu)化的脂質(zhì)和聚合物配方。新推出的TransIT®-AAViator轉染體系，進一步降低了 AAV工藝生產(chǎn)流程中所需質(zhì)粒 DNA 和轉染試劑使用量，最大限度地提高不同AAV血清型滴度和實心率，從而提升 AAV生產(chǎn)工藝的總體生產(chǎn)效率。整合TransIT®-AAViator的AAV病毒上游生產(chǎn)工藝，無需通過細胞密度而調(diào)整試劑和質(zhì)粒DNA加入量，并且實現(xiàn)了單個生物反應器的生產(chǎn)劑量的成倍增加，大幅度降低了單位劑量的成本，為基于AAV 病毒的基因治療開發(fā)提供了更優(yōu)的解決方案。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱: TransIT®-AAViator Transfection System 上市日期：2024年10月7日 產(chǎn)品貨號: MIR 73750 / MIR 73745 產(chǎn)品組分：TransIT®-AAViator轉染試劑及RevIT? AAV增強子 Mirus Bio AAV病毒生產(chǎn)相關轉染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對150 mL 規(guī)格試劑 TransIT-AAViator®提升AAV生產(chǎn)效率&降低單劑量成本 生產(chǎn)劑量的成倍增加 隨著AAV病毒滴度的提升，單個反應器所允許生產(chǎn)劑量也成倍的增加，從而大幅度降低單劑量成本。 減少生產(chǎn)所需批次 提高AAV病毒生產(chǎn)總產(chǎn)量，減少每次生產(chǎn)的所需批次數(shù)量或擴大生物反應器規(guī)模才可滿足生產(chǎn)需求，緩解了由于產(chǎn)能不足等諸多限制。 減少質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)，降低了至少一半質(zhì)粒 DNA使用量 ，同時仍可保持高水平的滴度和實心率，進一步降低了批次生產(chǎn)成本。 加快工藝開發(fā)進程 TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)，只需較少實驗優(yōu)化，即可獲得最佳結果，從而縮短了工藝開發(fā)時間，加快了產(chǎn)品上市速度。 TransIT®-AAViator有著更高滴度和實心率 使用不同的質(zhì)粒設計(GFP基因-圖3；RPE65 基因-圖4)，平行比較TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)與“Poly F”(Polyplus FectoVIR® 病毒轉染試劑)以及“Poly P” (Polyplus PEIpro®病毒轉染試劑)。實驗結果顯示，在不同AAV血清型別中 (AAV5、8、9)，TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)有著更高的病毒滴度及實心率，當質(zhì)粒設設計替換成治療性基因(RPE65 基因)，病毒滴度及實心率相比于競爭品牌，其優(yōu)勢更加顯著。 圖3. 轉染GFP基因質(zhì)粒的AAV滴度 圖4. 轉染RPE65基因質(zhì)粒的AAV滴度 TransIT®-AAViator降低質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator轉染系統(tǒng)，在較低質(zhì)粒 DNA 用量仍可得到高水平AAV病毒滴度及實心率（圖5）。 圖5. 實驗使用TransIT® -AAViator轉染試劑(試劑:DNA比例為1.25:1,vol:wt)，以 1:1:1 的質(zhì)粒質(zhì)量比轉染 pAAV-WPRE-GFP (Aldevron), pAAV-Helper (Aldevron) 和 pAAV-RepCap (AAV9 Genemedi)三質(zhì)粒。轉染時加入RevIT AAV Enhancer（1 μl/mL），轉染后 72 小時使用化學裂解法收獲 AAV病毒。 TransIT-AAViator實驗流程 Step 1: 轉染前，需保證生長在培養(yǎng)基中的懸浮 HEK 293 細胞活率 > 95%。 Step 2: 轉染時：建議細胞密度為 ~ 3 × 10E6 cells/mL，TransIT®- AAViator 試劑與DNA 加入比例為1:1 - 1.5:1，每 1 mL 培養(yǎng)基加入RevIT AAV Enhancer 0.5 - 1.5 μl；靜止條件下孵育15-45 分鐘，以便形成轉染復合物，然后輕柔的加入細胞中。 Step 3: 轉染后無需更換培養(yǎng)基，一般可在轉染后 48-72 小時收獲AAV病毒。 客戶案例分享 最新線上webinar：Enhancing AAV Production: A Novel Transfection System for Cell and Gene Therapy Applications (鏈接) 演講者信息： Webinar內(nèi)容一覽： 通過該線上Webinar，可了解TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)，包括了開發(fā)初衷、數(shù)據(jù)性能對比及展示等。來自Affinia Therapeutics 高級工藝開發(fā) Michael White， 強調(diào)了該轉染系統(tǒng)的可擴展性和工作流程的易整合性，是想要優(yōu)化上游工藝和增加整體成本效益的理想選擇。 此外，Michael White分享了 Affinia Therapeutics AAV轉染平臺體系納入TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)經(jīng)驗，強調(diào)該系統(tǒng)能夠降低質(zhì)粒DNA用量，同時也在不同規(guī)模中進行了測試(搖瓶-3L反應器)，可穩(wěn)定的保持高水平滴度，從而大幅度提高了生產(chǎn)工藝的效率，同時降低了AAV病毒生產(chǎn)成本。 討論重點包括： Affinia 比較了新一代轉染系統(tǒng)TransIT®-AAViator與當前使用的平臺工藝； Affinia 在將TransIT-AAViator® 與其他試劑性能進行比較中，如何優(yōu)化使其性能顯著優(yōu)于其他轉染試劑； 整合TransIT®-AAViator轉染系統(tǒng)，相比于優(yōu)化前實現(xiàn)了3 倍滴度提升及 70% 實心率。 小結 新一代專為優(yōu)化AAV 生產(chǎn)工藝而推出的轉染試劑: TransIT®-AAViator 轉染系統(tǒng)： 與基于單個組分(如PEI)轉染試劑不同，可顯著的提高不同AAV 血清型別的滴度及實心率； 有著更低轉染試劑及質(zhì)粒DNA使用量需求，同時保持高水平的AAV滴度及實心率； 相比于競爭品牌(FectoVIR&PEIpro等)，有著更高基因組滴度及實心率，并且質(zhì)粒設計為治療基因，其優(yōu)勢更加顯著。 相關產(chǎn)品信息及鏈接 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 貨號 NEW! TransIT®-AAViator Transfection System 2 x 1.5 ml MIR 73750 1 × 30 ml MIR 73745 RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW! RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN® AAV轉染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN®轉染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN® GMP級別轉染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN® AAV轉染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN® GMP級別AAV轉染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN® LV轉染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN® GMP級別LV轉染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP Mirus成立于1995年，始終秉承著為基因遞轉提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過 25 年轉染領域的深根細作，獲得了多項技術突破，已成為核酸遞送領域的全球領導者和值得信賴的品牌。Mirus科學家團隊不斷突破轉染技術的極限，推出了VirusGEN®轉染試劑與RevIT?增強劑，進一步提升AAV/LV產(chǎn)量，助力推動生物治療藥物的降本增效，為CGT領域客戶賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)代理，始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.tzapk.com了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

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Bambanker細胞凍存液保護性能好、成分明確且滿足GMP生產(chǎn)標準，是生物制品細胞庫凍存的理想方案。 更多>

生物制品內(nèi)毒素去除策略——Etoxiclear?內(nèi)毒素親和層析

內(nèi)毒素作為生物藥安全檢項，是法規(guī)要求的必檢項，所有藥物生產(chǎn)對于內(nèi)毒素的控制都非常嚴格（＜5EU/kg體重），內(nèi)毒素的去除成為生物藥工藝控制的一個重要環(huán)節(jié)。內(nèi)毒素去除目前面臨的困境是比較耗時，同時去除過程也會導致產(chǎn)品的損失以及毒性物質(zhì)的引入。所以內(nèi)毒素的去除一直困擾很多企業(yè)，特別是在大腸桿菌大規(guī)模生產(chǎn)階段。 內(nèi)毒素的去除方法主要有超速離心，離子交換和親和層析的方法，在大規(guī)模生產(chǎn)工藝中內(nèi)毒素的去除主要采用后兩種方式，離子交換原理是結合帶負電荷的內(nèi)毒素，對于質(zhì)粒DNA或者酸性蛋白質(zhì)的內(nèi)毒素去除效果會不夠理想，所以目前工業(yè)界傾向于親和層析的方法去除內(nèi)毒素。親和層析的好處在于能夠特異性結合內(nèi)毒素，終產(chǎn)品的損失少（相對于離子交換），應用范圍較廣，包括質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)，同時，也不會有毒性物質(zhì)的引入。 本文將推薦一款來自英國Astrea Bioseparations的Etoxiclear?層析介質(zhì)，它是一種高性能、非離子交換、合成的親和層析吸附劑，可經(jīng)濟高效地去除內(nèi)毒素，支持GMP生產(chǎn)，有凝膠和一次性預裝柱兩種形式產(chǎn)品，滿足不同的工藝需求。 什么是EtoxiClear?親和層析？ 親和層析是一種特殊的蛋白質(zhì)純化方法，其利用生物分子之間的特異相互作用進行分離。EtoxiClear?親和層析針對內(nèi)毒素具有高選擇性和高分辨率，可以更好的去除內(nèi)毒素。親和層析的優(yōu)點在于其高度特異性和高純度，適用于對純度要求很高的生物制品的生產(chǎn)。雖然過離子柱可以在一定程度上控制內(nèi)毒素水平，但是個別項目仍然會有超標的可能。EtoxiClear?是市場上非常獨特的一款去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品，相比于離子層析方法，EtoxiClear?優(yōu)勢包括：高特異性：專為去除內(nèi)毒素而設計，可特異性去除內(nèi)毒素高載量：高內(nèi)毒素動態(tài)結合載量（> 1,000,000 EU/ml）；經(jīng)濟高效，支持放大；pH兼容范圍廣：pH 4.0 - pH 8.0，滿足GMP物料要求，法規(guī)注冊資料完善低蛋白結合率：通常目的蛋白回收率>90%；高度穩(wěn)定、人工合成、無毒的親和配基；有預裝柱和填料兩種產(chǎn)品形式，可滿足不同需求。填料耐堿性強：0.5M-1M NaOH CIP EtoxiClear?內(nèi)毒素親和填料性能數(shù)據(jù) 可擴展性EtoxiClear?已被證明能夠在實驗室規(guī)模(5mL柱)和工業(yè)規(guī)模(785mL)下有效去除純化的免疫球蛋白溶液中的內(nèi)毒素。上樣：含有相似起始內(nèi)毒素濃度的IgG蛋白溶液(~5 mg/mL) 處理能力強EtoxiClear?可提供填料和預裝柱兩種形式產(chǎn)品，以滿足不同的實驗需求。下表可用于估算處理不同規(guī)模樣品所需的柱尺寸。規(guī)格：EvolveD?柱，5 min保留時間 針對常用緩沖液的內(nèi)毒素清除數(shù)據(jù)EtoxiClear?可用于各種緩沖液的內(nèi)毒素去除。下表顯示了細胞培養(yǎng)應用中常用的各種緩沖液的內(nèi)毒素清除效率，即使較低的起始內(nèi)毒素濃度(~20EU/mL)也可以有較高的內(nèi)毒素清除率。* 等于或低于檢測限值 高內(nèi)毒素清除率EtoxiClear?具有很高的內(nèi)毒素清除率，可從多種蛋白樣品中進行出色的蛋白質(zhì)回收，如下表所示的人血清白蛋白（HSA）和免疫球蛋白（IgG）溶液(均為~9 mg/mL)。 HSA樣品內(nèi)毒素清除率99.7% IgG樣品內(nèi)毒素清除率98.9% 低蛋白結合率與離子交換吸附劑不同，EtoxiClear?顯示出極低的蛋白質(zhì)結合性，不受蛋白質(zhì)等電點范圍限制，蛋白質(zhì)回收率高(通常高于90%)，如下所示： EtoxiClear?技術參數(shù) 產(chǎn)品訂購信息貨號品名規(guī)格3250-00010EtoxiClear (10 mL)10mL3250-00025EtoxiClear (25 mL)25mL3250-00100EtoxiClear (100 mL)100mL3250-00500EtoxiClear (500 mL)500mL3250-01000EtoxiClear (1 L)1L6646EtoxiClear? 4 x 1 mL4x1mL6647EtoxiClear? 4 x 5 mL4x5mL6746EtoxiClear® Column, 1 x 1 mL1 x 1 mL6747EtoxiClear® Column, 1 x 5 mL1 x 5 mL4251-00005EtoxiClear 5 mL Column5mL4251-00050EtoxiClear 50 mL Column50mLAS025100-PC3250-GEtoxiClear 50 mL EvolveS50mL4520-PC3250EtoxiClear?, 200 µL200µL Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學，擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗，是世界級層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務供應商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發(fā)和生產(chǎn)基地，專注為生物大分子和CGT領域提供行業(yè)領先的層析介質(zhì)和技術服務。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時問題，實現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程，完全符合當今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國區(qū)代理，為用戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎隨時撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.tzapk.com了解更多信息。 更多>

Applichem藥典級二甲基亞砜DMSO，萬能溶劑的卓越之選

二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機化合物，因為結構中具有一個親水的亞硫酰基和兩個疏水的甲基，它既可與水溶液也可與除石油醚外的大多數(shù)有機溶劑互溶，可以溶解約80%的化合物，具有“萬能溶劑”的稱號。在實驗中通常應用在以下方面： 1. 細胞凍存 DMSO是一種有效的低溫保護劑，能夠在細胞凍存過程中減少冰晶形成，降低冰晶對細胞的物理損傷。同時，DMSO能夠提高細胞膜的透過性，使細胞更易于吸收凍存保護劑，從而提高細胞在低溫下的存活率。 2. 藥物和化合物的溶解劑 DMSO具有極佳的溶解能力，能夠溶解許多其他溶劑難以溶解的有機化合物，包括多種藥物，這使得DMSO成為進行藥物篩選和細胞治療研究中的理想溶劑。 3. 作為滲透劑 DMSO的滲透特性使其能夠增加細胞膜的透性，幫助藥物、DNA等分子進入細胞。 4. 在化學和生物學反應中的應用 在某些化學合成和酶促反應中，DMSO可作為反應介質(zhì)，促進反應的進行或提高反應的效率。DMSO還可能影響細胞的信號傳導途徑，對于研究細胞生物學過程有時可以是一個有用的副作用。 PanReac AppliChem的藥典級二甲基亞砜 (貨號：191954)，歐洲生產(chǎn)，高純度，超低金屬離子含量，符合ICH Q3D質(zhì)量標準，滿足USP, Ph Eur, BP等多國藥典。質(zhì)優(yōu)價廉，供應穩(wěn)定，有1L、2.5L、5L、25L、190L多種規(guī)格，滿足不同應用和工藝階段需求，一直受到全球客戶的廣泛青睞。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第16個CDE登記號-鹽酸氨丁三醇Tris HCL

“ 熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級鹽酸氨丁三醇Tris HCL（T-154）喜獲CDE登記號F20240000584. 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第16個CDE登記號！”生物緩沖劑在生命科學研究中起著至關重要的作用。Tris （三羥甲基氨基甲烷） 和Tris HCL是生物制藥行業(yè)應用非常廣泛的緩沖液，在維持溶液pH穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要作用，Tris Base的應用非常廣泛，可用于藥物生產(chǎn)、有機合成、生物緩沖劑等，而Tris-HCL是Tris和鹽酸（HCL）的混合物，主要作用增加溶液的離子強度，從而穩(wěn)定pH值。Tris-HCL也是其他緩沖液如TBS、TBST、TE等的重要成分。目前藥典對Tris HCL無專論，Pfanstiehl將贊助USP設立Tris HCL的專論。Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均為注射級別，具有高純度，超低內(nèi)毒素，超低金屬雜質(zhì)殘留的特點，并同時檢測各種酶的殘留，如DNA酶，RNA酶，磷酸酶和脂肪酶等，也是全球首款將亞硝酸鹽加入質(zhì)控標準的Tris Base和Tris HCL，符合生物制藥和疫苗的生產(chǎn)要求。目前Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均已完成DMF和CDE的備案。產(chǎn)品信息： · 產(chǎn)品名稱: Tris HCl, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals· 中文名稱：鹽酸氨丁三醇· 分子式：C4H12ClNO3· 分子量：157.59g/mol· CAS號：1185-53-1· 產(chǎn)品貨號：T-154產(chǎn)品特點：· 高純度，超低內(nèi)毒素，超低微生物含量，超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶，脂肪酶的檢測· 符合ICH Q3D標準DNA· 符合GMP標準· CDE登記號：F20240000584· DMF登記號：039584產(chǎn)品應用：· 緩沖液 如果您對Pfanstiehl的Tris Base T-153和Tris HCL T-154感興趣，可聯(lián)系Pfanstiehl 中國區(qū)代理北京西美杰科技有限公司獲得詳細的產(chǎn)品概況說明文件。也歡迎聯(lián)系獲取測試樣品。 Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下，歡迎聯(lián)系北京西美杰獲取100g裝免費樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國代理，為客戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.tzapk.com了解更多信息。 更多>

Cygnus Protein A Mix-N-GoTM ELISA，蛋白A殘留檢測的金標準

Cygnus Protein A Mix-N-Go?系列ELISA試劑盒是專為檢測大多數(shù)天然和重組Protein A殘留而設計，其采用了革命性的一步法樣品處理程序。相比傳統(tǒng)的Protein A ELISA方法，Mix-N-GoTM系列ELISA試劑盒簡化了實驗步驟，縮短了實驗時間，同時提高了方法的可靠性。 更多>

GMP RevIT? AAV Enhancer新上市，助力于AAV病毒GMP生產(chǎn)

自2023年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer以來，RevIT? AAV Enhancer的加入允許不同血清型AAV病毒基因組滴度提高1.2-4.9倍，并且在一定程度提升了實心率，使得AAV生產(chǎn)上游成本進一步降低成為可能，降低了基因治療單劑量成本。由于可輕松靈活的將RevIT整合入現(xiàn)有AAV生產(chǎn)工藝工作流程中，不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN&reg; GMP 轉染試劑，也適配于其他轉染試(如PEI)，RevIT? AAV Enhancer得到了國內(nèi)外AAV客戶的廣泛認可及好評，GMP級別試劑也按照計劃如期上市，用于大規(guī)模的AAV GMP生產(chǎn)。 RevIT? AAV Enhancer于2024年9月30日推出GMP級別，由ISO 13485體系認證的工廠生產(chǎn)，符合ISO 20399以及USP<1043>標準。自2023年7月28上市的RevIT? AAV Enhancer，已證明在不同血清型、細胞培養(yǎng)基以及轉染平臺上，可提高至少2-4倍病毒滴度；在保持高質(zhì)量滴度的同時，允許更低質(zhì)粒DNA用量，從而大幅度降低AAV病毒生產(chǎn)成本。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱：RevIT? GMP AAV Enhancer 上市日期：2024年9月30日 產(chǎn)品貨號：MIR 8200-GMP 產(chǎn)品規(guī)格：200mL（液體） 更多RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)及RevIT? AAV Enhancer詳細信息，請見微信軟文《新品上市 | RevIT? AAV Enhancer， 提高AAV產(chǎn)量的又一利器！》 RevIT AAV Enhancer 以及TransIT-VirusGEN 轉染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對150 mL 規(guī)格試劑 GMP支持詳情 Residual Reagent Assay殘留檢測 Regulatory Support Package 法規(guī)支持文件 Product Safety Risk Assessment | Supplemental Information產(chǎn)品安全性風險評估| 補充信息 Manufactured and Tested in Alignment with Mirus 生產(chǎn)及檢測與Mirus標準體系一致 ISO 13485 QM Mirus Bio GMP 質(zhì)量標準 ISO 13485驗證體系 Mirus Bio所開發(fā)以及供應的輔助材料(Ancillary material)，可用于細胞和基因療法的RUO和GMP合規(guī)性工藝生產(chǎn)。 Mirus Bio的質(zhì)量管理體系通過了ISO 13485認證，可用于技術轉讓以及分銷GMP級輔助材料。 Mirus Bio 開發(fā)及實施以客戶為中心的質(zhì)量管理體系（QMS），可作為值得信賴的合作伙伴，滿足細胞和基因治療客戶需求的承諾。以下指導文件為Mirus Bio建立質(zhì)量管理體系所參考的質(zhì)量標準文件： ISO 13485:2016, Medical devices – Quality management systems – Requirements for regulatory purposes ISO 20399:2022, as ancillary materials present during the production of cellular therapeutic products USP<1043>, with respect to Tier 2 ancillary materials for cell, gene and tissue-engineered product 更多客戶案例分享 最新線上webinar：Pairing a novel enhancer with transfection reagents to enable high-titer rAAV production 演講者信息： Florian Dziopa，MeiraGTx 上游工藝負責人(Director of Upstream Process) ，在MeiraGTx工作的過去六年里，一直致力基于懸浮HEK293細胞瞬轉工藝的AAV生產(chǎn)平臺優(yōu)化。 René Gantier，Repligen 高級生物工藝應用研發(fā)Director，有著超過二十年的產(chǎn)品開發(fā)及工藝純化經(jīng)驗。 Becky Reese，Mirus Bio研發(fā) 該Webinar可以 (線上觀看鏈接)： 了解如何實現(xiàn)病毒載體的生產(chǎn)工藝流程優(yōu)化提升； 了解 VirusGEN&reg; 轉染試劑是如何幫助涉及不同種轉染工作流程以及 AAV 血清型的工藝流程，其產(chǎn)量全面提升； 從生產(chǎn)工藝流程角度出發(fā)，如何降低細胞和基因療法的單位劑量成本 簡化了從技術評估到工藝生產(chǎn)的整個過程 Poster數(shù)據(jù)：Optimizing Key Parameters for AAV5 Clinical Manufacturing: Enhancing Process Productivity and Drug Substance Quality (鏈接) Bridgebio在該poster中分享了基于AAV5型別，使用TransIT-VirusGEN&reg; 轉染試劑以及RevIT? AAV Enhancer在搖瓶階段線性放大至200L(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L)病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結果(圖左)。與之前工藝相比 (工藝A：PEIPro轉染 + Expi293細胞/培養(yǎng)基)，替換成TransIT-VirusGEN&reg; 轉染試劑的工藝流程 (工藝B：TransIT-VirusGEN&reg; 轉染試劑 + Expi293細胞 + BalanCD培養(yǎng)基；工藝C：TransIT-VirusGEN&reg; 轉染試劑 + VP2.0細胞 + BalanCD培養(yǎng)基)，有著更高的病毒滴度(圖右)及更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 相關產(chǎn)品信息 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 貨號 RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW！ RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN&reg; AAV轉染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN&reg;轉染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN&reg; GMP級別轉染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN&reg; AAV轉染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN&reg; GMP級別AAV轉染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN&reg; LV轉染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN&reg; GMP級別LV轉染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP 新產(chǎn)品速遞 TransIT&reg;-AAViator 轉染系統(tǒng)，基于Mirus Bio專利且成熟的聚合物和脂質(zhì)技術平臺上做開發(fā)，與單純基于聚合物(PEI)的轉染試劑相比，可進一步提高 AAV 載體的產(chǎn)量，并允許降低一半的質(zhì)粒 DNA 用量。TransIT-AAViator 系統(tǒng)由新型 TransIT-AAViator 轉染試劑和 RevIT? AAV 增強劑組成。結合使用后，極大的優(yōu)化了AAV工藝生產(chǎn)中關鍵一環(huán)-上游轉染，最大限度提高 AAV 滴度，更多詳情敬請期待。 Mirus成立于1995年，始終秉承著為基因遞轉提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過 25 年轉染領域的深根細作，獲得了多項技術突破，已成為核酸遞送領域的全球領導者和值得信賴的品牌。Mirus科學家團隊不斷突破轉染技術的極限，推出了VirusGEN&reg;轉染試劑與RevIT?增強劑，進一步提升AAV/Lv產(chǎn)量，助力推動生物治療藥物的降本增效，為CGT領域客戶賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)總代理，始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務，Mirus熱銷轉染產(chǎn)品常備現(xiàn)貨。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.tzapk.com了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

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北京西美杰科技有限公司（Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd，以下簡稱西美杰）于2006年成立，由留美歸國生物領域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅持自己的經(jīng)營理念，勤奮踏實地整合全球產(chǎn)品資源與技術資源，為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務方案，幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時間... 更多>

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